Please use this identifier to cite or link to this item: http://hdl.handle.net/10995/50335
Title: Хроматографическое и хромато-масс-спектрометрическое определение противотуберкулезных препаратов основного ряда в плазме крови
Other Titles: Chromatographic and liquid chromatography-tandem-mass spectrometry determination of first-line anti-tuberculosis drugs in human plasma
Authors: Бессонова, Е. А.
Карцова, Л. А.
Соловьёва, С. А.
Bessonova, E. A.
Kartsova, L. A.
Soloveva, S. A.
Issue Date: 2016
Publisher: Уральский федеральный университет
Citation: Бессонова Е. А. Хроматографическое и хромато-масс-спектрометрическое определение противотуберкулезных препаратов основного ряда в плазме крови / Е. А. Бессонова, Л. А. Карцова, С. А. Соловьёва // Аналитика и контроль. — 2016. — № 2. — С. 161-167.
Abstract: В работе выявлены возможности одновременного определения четырех противотуберкулезных препаратов (ПТП) ( этамбутол, пиразинамид, изониазид, рифампицин ) методами обращённо-фазовой ВЭЖХ (ОФ ВЭЖХ) и ион-парной хроматографии. Предложен вариант одновременного определения этих ПТП в плазме крови человека методом ОФ ВЭЖХ с тандемным масс-спектрометрическим детектированием с электроспрей ионизацией. Детектирование осуществляли в режиме положительной ионизации путём мониторинга множественных реакций (MRM). Оптимизированы условия фрагментации для каждого лекарственного вещества. Найдены условия подготовки плазмы крови к ВЭЖХ/МС анализу, включающие осаждение белков плазмы крови ацетонитрилом. Значения степеней извлечения ПТП составили 85-90 %. Проведена оценка влияния матрицы пробы на разделение и ионизацию ПТП методом пост-экстракционной добавки. Показано, что разбавление экстракта плазмы крови в 10 раз достаточно для требуемого снижения матричного эффекта. Изучена стабильность ПТП в процессе анализа (автосамплер 1 и 12 ч.) и в условиях хранения (3 цикла заморозка-разморозка). Предложен способ увеличения стабильности рифампицина с добавлением в качестве антиоксиданта аскорбиновой кислоты (1 мг/мл). Пределы обнаружения с УФ детектированием составили от 2 до 20 мкг/мл, с МС детектированием в SIM-режиме от 2 до 15 нг/мл и в MRM-режиме от 0.5 до 10 нг/мл. В оптимизированных условиях показана возможность обнаружения и количественного определения всех четырех ПТП в плазме крови больного туберкулезом с проводимой лекарственной терапией.
In the current study the possibility of the simultaneous determination of anti-tuberculosis (anti-TB) drugs (isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin) using the reversed-phase HPLC (RP-HPLC) and ion-pair chromatography was investigated. A selective and highly sensitive liquid chromatography/tandem mass spectrometry method for the simultaneous determination of four anti-TB drugs (isoniazid, pyrazinamide, ethambutol and rifampicin) in the human plasma was developed. The detection was carried out using the multiple reaction-monitoring (MRM) modes with positive polarity. The fragmentation conditions for each drug were optimized, and the conditions for the blood plasma preparation for HPLC/MS analysis, including the protein precipitation with ACN with a ratio of 3:1 (by volume), were chosen. The matrix effects on the separation and ionization of anti-TB drugs were estimated by the post-extraction additives method. It was shown that the 10-fold dilution of plasma extracts was sufficient to decrease the influence of the sample matrix. The stability of anti-TB drugs during the analysis (in autosampler at 1 and 12 hours) and at storage conditions (3 cycles of freeze-thaw) was studied. The method for increasing the stability of rifampicin using ascorbic acid (1 mg/ml) as antioxidant was provided. The LOD with UV detection were 2 - 20 µg/ml, in SIM-mode - 2 - 15 ng/ml and in MRM-mode - 0.5 - 10 ng/ml respectively. The possibility of the determination of four anti-TB drugs in real plasma samples of patients with tuberculosis undergoing drug therapy in optimized conditions HPLC/MC was shown.
Keywords: ANTI-TUBERCULOSIS DRUGS
RP HPLC
LC/MS/MS
MATRIX EFFECT
ПРОТИВОТУБЕРКУЛЁЗНЫЕ ПРЕПАРАТЫ
ОФ ВЭЖХ
МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЧЕСКОЕ ДЕТЕКТИРОВАНИЕ
МАТРИЧНЫЙ ЭФФЕКТ
СТАБИЛЬНОСТЬ РИФАМПИЦИНА
URI: http://hdl.handle.net/10995/50335
RSCI ID: 26191871
SCOPUS ID: 85015256891
ISSN: 2073-1442 (Print)
2073-1450 (Online)
DOI: 10.15826/analitika.2016.20.2.007
Origin: Аналитика и контроль. 2016. № 2
Appears in Collections:Аналитика и контроль

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
aik_2016_02_161-167.pdf741,78 kBAdobe PDFView/Open


Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.