УВЭЖХ-МСВР-определение некоторых рилизинг-пептидов гормона роста в моче

Abstract

Wide dissemination of growth hormone-releasing peptides for professional athletes as well as in amateur sports requires constant attention from the law enforcement agencies. However, in addition to examining the seized materials to establish their active components, it is advisable and necessary to control the growth hormone-releasing peptides in the urine at the trace concentration level since the effective doses of the use of growth hormone-releasing peptides are relatively low and the rate of their excretion from the body often does not allow the determination of native compounds and their metabolites even a few days after the administration. A procedure for the measurement of some growth hormone-releasing peptides in the urine using the ultra­high-performance liquid chromatography (UHPLC) in combination with the high-resolution mass spectrometry (HRMS) has been proposed. It was found that the highest sensitivity could be achieved by utilizing the mobile phase consisting of 0.1% solution of trifluoroacetic acid in water and acetonitrile acidified with trifluoroacetic acid (0.1%). The concentration factor using the solid-phase extraction has been established. As it could be seen from the presented data, the highest extraction efficiency was achieved using the cation-exchange sorbents, while the octadecyl sorbent, in fact, was ineffective in this case. The matrix effects were noted not to exceed 15% during the research. The use of HRMS allows for high sensitivity due to the selectivity of the method.

Повсеместное распространение ряда рилизинг-пептидов гормона роста и их употребление в профессиональном и любительском спорте в силу специфических свойств этих вспомогательных препаратов влечет за собой непрестанное внимание со стороны надзорных органов. Помимо проведения экспертиз изъятых материалов с целью установления действующих компонентов, присутствующих в них, целесообразен и необходим контроль их содержания в моче на уровне следовых концентраций. Это обусловлено тем, что эффективные дозы употребления рилизинг-пептидов гормона роста относительно невысоки, и скорость выведения их из организма зачастую не позволяет проводить определение нативных соединений и их метаболитов уже спустя несколько дней после употребления. Предложена методика определения некоторых рилизинг-пептидов гормона роста в моче с использованием ультравысокоэффективной жидкостной хроматографии в сочетании с масс-спектрометрией высокого разрешения и твердофазным концентрированием аналитов. Изучена возможность применения различных сорбентов для проведения твердофазной экстракции. Оценена чувствительность определения этих веществ предложенным методом, установлено, что наибольшей чувствительности можно добиться с использованием подвижной фазы, состоящей из 0.1 % раствора трифторуксусной кислоты в воде и ацетонитрила, подкисленного трифторуксусной кислотой (0.1 %). Установлен фактор концентрирования при применении твердофазной экстракции. Из представленных данных видно, что наибольшая эффективность извлечения достигается благодаря применению катионообменных сорбентов, в то время как октадецильный сорбент, фактически, является неэффективным для решения поставленной задачи. Установлено, что матричные эффекты при выполнении исследований не превышали 15 %. Применение МСВР позволяет обеспечить высокую чувствительность благодаря селективности метода.