Определение глицирризиновой кислоты в корнях солодки методом ВЭЖХ с субкритической экстракцией

Abstract

Glycyrrhizic acid belongs to triterpene saponins and is the target component in obtaining extracts from the licorice root (Glycyrrhiza glabra). In the current paper, a technique has been developed for the determination of glycyrrhizic acid (GA) in licorice roots using the method of high-performance liquid chromatography (HPLC) with the preliminary extraction under subcritical conditions. To optimize the conditions for the sample preparation, an assessment was made of the efficiency of HA extraction with water and ammonia solutions at temperatures of 120, 150 and 170 °C and 5 MPa pressure under the dynamic conditions in comparison with the extraction on a water bath with water, solutions of ammonia, acetone, and 3% solution of nitric acid in acetone. It was shown that the maximum extraction of GA under all the extraction modes studied was carried out by the extraction with water at t = 150 ?C and a flow rate of 1.7 cm3/min, comparable results are obtained by extraction with a 3% solution of ammonia under the same conditions. For the quantitative analysis, it was proposed to use the HPLC method with gradient elution. It was shown that the application of the developed technique allows for more accurate identification and quantitative determination of GA in licorice roots in comparison with the traditionally used gravimetric method.

Глицирризиновая кислота относится к тритерпеновым сапонинам, является целевым компонентом при получении экстрактов из корня солодки ( Glycyrrhiza glabra ). В данной работе разработана методика определения глицирризиновой кислоты (ГК) в корнях солодки голой методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с предварительной экстракцией водой в субкритических условиях. Для оптимизации условий пробоподготовки проведена оценка эффективности извлечения ГК водой и растворами аммиака при температурах 120, 150 и 170 °C и давлении 5 МПа в динамических условиях в сравнении с экстракцией на водяной бане водой растворами аммиака, ацетоном, 3 % раствором азотной кислоты в ацетоне. Показано, что максимальное извлечение ГК при всех изученных режимах экстракции происходит при экстракции водой при t = 150 ?C и скорости потока 1.7 см3/мин, сопоставимые результаты дает экстракция 3 % раствором аммиака в тех же условиях. Извлечение ГК в субкритических условиях в 2-3 раза превосходит извлечение ГК на водяной бане. Для проведения количественного анализа предложено использование метода ВЭЖХ с градиентным элюированием. Показано, что применение разработанной методики позволяет проводить более точную идентификацию и количественное определение ГК в корнях солодки по сравнению с традиционно используемым гравиметрическим методом и описанными в литературе методиками ВЭЖХ-анализа.