Определение следовых количеств N-метил-1-фенил-2-пропанамида в пробах мочи с использованием сорбентов на основе молекулярных отпечатков

Abstract

N-methyl-1-phenyl-2-propanamine is one of the compounds controlled in the clinic and forensic toxicology, and its determination methods with the high sensitivity could significantly improve the confidence of analyses. Taking into account that the equipment of the most Russian laboratories of forensic and clinical toxicology is generally based on the GC/MS systems, the sensitivity improvement for the methods could be achieved by the selective extraction of analytes during the sample preparation. The solid-phase extraction (SPE) using molecular imprinted polymer (MIP) - based sorbents is one of the new techniques of the selective extraction of analytes. In this study, two types of MIP-based cartridges (SupelMIP SPE – Amphetamines and SupelMIP SPE – Full Beta-Receptors) and conventional cation-mixed-based cartridges (Isolute Confirm HCX) were used for N-methyl-1-phenyl-2-propanamine determination in urine. The eluates were dried under the steam of nitrogen, followed by the derivatization with trifluoracetyl anhydride. Analyses were performed by GC/MS with electron ionization in scan mode. The achieved average recovery of N-methyl-1-phenyl-2-propanamine was 65% for «SupelMIP SPE – Amphetamines» cartridges, 78% for «SupelMIP SPE – Full Beta-Receptors» cartridges and 68% for «Isolute Confirm HCX» cartridges. Although comparable in recoveries, the limit of detection (LOD) of the analyte in urine prepared with cation-mixed-based cartridges was 10 ng∙ml-1, while for MIP-based cartridges the achieved LOD was 1 ng∙ml-1. The significant difference in sensitivity was due to the influence of the matrix compounds. The main part of the peaks in chromatograms of the samples prepared with MIP-based sorbents were associated with impurities of reagents, solutions, sorbents or soiled dishes, but not with urine content. In comparison with cation-exchange sorbents, the use of MIP-based sorbents allowed to increase the sensitivity by an order of magnitude in conducting confirmatory GC-MS analysis for N-methyl-1-phenyl-2-propanamine determination.

N-метил-1-фенил-2-пропанамин является одним из соединений, определяемых в моче в ходе судебно-медицинской или судебно-токсикологической экспертизы. Известно, что наличие высокочувствительных подтверждающих методов позволяет существенно повысить достоверность анализа. Учитывая, что в российских химико-токсикологических лабораторий в основном применяются газовые хроматографы с моноквадрупольными масс-спектрометрами, повышение чувствительности методов может достигаться путем селективного извлечения аналитов на стадии подготовки проб. Одним из новых способов селективного извлечения является применение сорбентов на основе молекулярных отпечатков. Для определения N-метил-1-фенил-2-пропанамина в моче применяли три различные схемы проведения твердофазной экстракции (ТФЭ) с использованием картриджей с сорбентами на основе молекулярных отпечатков соединений («SupelMIP SPE – Amphetamines», «SupelMIP SPE – Full Beta-Receptors») и картриджей, содержащих катионобменный сорбент, традиционно используемый для анализа фенилалкиламинов в биопробах («Isolute Confirm HCX»). После проведения ТФЭ элюаты упаривали досуха, дериватизировали трифторуксусным ангидридом и анализировали методом газовой хромато-масс-спектрометрии с электронной ионизацией в режиме сканирования. Средняя степень извлечения N-метил-1-фенил-2-пропанамина для картриджей «SupelMIP SPE – Amphetamines» составила 65 %, для картриджей «SupelMIP SPE – Full Beta-Receptors» – 78 %, а для картриджей «Isolute Confirm HCX» – 68 %. Несмотря на сравнимые значения степеней извлечения, предел обнаружения N-метил-1-фенил-2-пропанамина для картриджей с сорбентами на основе молекулярных отпечатков составил 1 нг∙мл-1, в то время как при использовании картриджей «Isolute Confirm HCX» – 10 нг∙мл-1. Существенные различия в чувствительности обусловлены влиянием матричных соединений. Показано, что на хроматограммах биопроб, приготовленных на картриджах «SupelMIP SPE – Amphetamines» и «SupelMIP SPE – Full Beta-Receptors», основная часть пиков соединений была связана с загрязнениями посуды, растворов, реагентов или сорбента, но не с компонентами биопроб. Применение сорбентов на основе молекулярных отпечатков соединений позволяет на порядок повысить чувствительность в отношении N-метил-1-фенил-2-пропанамина при проведении подтверждающих анализов методом газовой хромато-масс-спектрометрии.