Некоторые особенности определения индексов удерживания в обращенно-фазовой ВЭЖХ

Abstract

Обсуждаются особенности определения индексов удерживания в обращенно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ ВЭЖХ), в том числе разнообразные возможности применения рекуррентных соотношений. Показано, что в ОФ ВЭЖХ в качестве параметров удерживания несорбируемого компонента («мертвое» время, t 0) предпочтительнее использовать не экспериментально определенные значения, а вычисленные величины. Они обеспечивают линейность зависимостей lg ( t R - t 0) = an C + b , где n C - число атомов углерода в молекулах гомологов, выбранных в качестве реперных компонентов ( н -алкилфенилкетоны). Для теоретической оценки t 0 по временам удерживания трех последовательных реперных компонентов вместо известного уравнения Петерсона и Хирша рекомендованы рекуррентные соотношения t R( nС - 1) = at R( n C) + b , откуда следует t 0 = lim ( t R)½(nC® 0) = b / (1 - a ) при условии 0 < a < 1. Еще одна область эффективного применения рекуррентных соотношений обусловлена тем, что диапазоны концентраций органических компонентов элюентов при разделении гидрофильных аналитов с малыми временами удерживания и более гидрофобных реперных н -алкилфенилкетонов могут не перекрываться или же перекрываться лишь частично. В подобных случаях целесообразно расширение массивов данных за счет экстраполированных значений или для целевых аналитов, или же (предпочтительнее) для реперных компонентов. Для этого рекомендован еще один вариант рекуррентных соотношений, а именно t R( C ± D C ) = at R( C ) + b , D C = const. Рассмотренные особенности применения рекуррентных соотношений в ОФ ВЭЖХ иллюстрированы примерами.

The features of the retention indices determination in reversed phase high performance liquid chromatography (RP HPLC) are discussed, namely the different possibilities of the application of the recurrent relations. At first, not the experimental, but the precalculated values are recommended as the retention parameters of non-sorbable compound (dead time, t 0) in RP HPLC. It is because just the precalculated values provide the linearity of relationships lg ( t R - t 0) = an C + b , where n C is the number of carbon atoms in molecules of homologs selected as reference compounds ( n -alkyl phenyl ketones). Besides the known Peterson and Hirsch equation for the theoretical evaluation of t 0 using the retention times of three consecutive homologs, the following recurrent relations are also recommended: t R( nС - 1) = at R( n C) + b , from where it follows that t 0 = lim ( t R)½( n C ® 0) = b / (1 - a ) under the condition that 0 < a < 1. Another area of the effective application of the recurrent relations is caused by the following fact: the ranges of the concentrations of the eluent’s organic constituents during the separation of hydrophilic analytes and hydrophobic reference n -alkyl phenyl ketones may not overlap, or overlap only partially. In such cases, expanding the data arrays seems to be reasonable using the extrapolated values both for the target analytes, and (preferably) for the reference compounds. For these purposes, another kind of recurrent relations can be recommended, namely t R( C ± D C ) = at R( C ) + b , D C = const. All recommendations on the application of recurrent relations in RP HPLC are illustrated with examples.